Sąvoka „mikroskopija“turi graikiškas šaknis. Išvertus tai reiškia objektų tyrimą naudojant didelio tikslumo instrumentus. Pastaruoju metu vis populiarėja fluorescencinė ir elektroninė mikroskopija.
Rezoliucija
Pagal tai, kaip taisyklė, jie supranta mažiausią atstumą, per kurį gali būti aiškiai atskiriami objektai. Įsiskverbimo į mikroskopinį pasaulį laipsnis, galimybė atsižvelgti į tiriamo elemento dydį priklausys nuo įrangos skiriamosios gebos. Esant dideliam padidinimui, objektų ribos gali susilieti. Atitinkamai, yra tam tikros ribos, kurias peržengus elementų apytikslis nustatymas yra beprasmis.
Liuminescencinės mikroskopijos metodas: mechanizmas
Kai medžiagos sugerta energija paverčiama matoma spinduliuote, atsiranda švytėjimas. Tai vadinama liuminescencija. Šis reiškinys atsiranda dėl to, kad kai kurios medžiagos, veikiamos šviesos, pradeda skleisti skirtingo (dažniausiai didelio) bangos ilgio spindulius. Be to, kai kurie objektai, kurie, esant normaliam apšvietimui, turi tam tikrąspalva, veikiant ultravioletiniams spinduliams pakeisti jų spalvą.
Specifiniai duomenys
Objektas, kurio nematyti ultravioletinėje šviesoje, gali skleisti ryškų blizgesį, jei jis yra apdorotas specialia medžiaga. Jame elementai tamsoje šviečia skirtingomis spalvomis. Spinduliuotės stiprumas yra skirtingas, tačiau, kaip taisyklė, jis yra mažas. Šiuo atžvilgiu fluorescencinė mikroskopija yra veiksminga tamsioje patalpoje. Naudojant tokio tipo tyrimą, objektas yra apžiūrimas šviesoje, kurią jis pats skleidžia. Audinių, ląstelių cheminė sudėtis turės įtakos tyrimo kokybei. Fluorescencinė mikroskopija tam tikru mastu laikoma histocheminiu tyrimu.
Klasifikacija
Fluorescencinė mikroskopija gali būti pirminė arba antrinė. Pastaruoju atveju objektas apdirbamas specialiais junginiais, kurie suteikia švytėjimo. Pirminė fluorescencinė mikroskopija pagrįsta paties elemento gebėjimu skleisti šviesą.
Įranga
Fluorescencinė mikroskopija atliekama naudojant įvairius prietaisus. Pagrindinis jų elementas yra apšvietimas. Jame yra UV lempa. Be to, įrenginiuose naudojamas filtrų rinkinys. Kai kuriuose įrenginiuose yra gana daug skirtingų konfigūracijų. Priklausomai nuo to, kokia spalva naudojama liuminescencijai sužadinti – ultravioletinė ar mėlyna, tarp šviesos š altinio ir tiriamo objekto dedamas atitinkamas filtras. Kadangi mikroskopinio elemento švytėjimas yra energetiškai silpnesnis nei jaudinanti šviesa, jis bus užfiksuotas tik esant vienai sąlygai. Pertekliniai spinduliai iš š altinio turi būti pašalinti geltonai žaliu filtru. Jis yra ant prietaiso okuliaro. Ryškiausias liuminescencijos poveikis bus tada, kai filtras visiškai nutraukia spindulius, sklindančius iš šviesos š altinio.
Iš ko susideda matomos šviesos instaliacija? Jame yra ryškus šviesos š altinis ir biologinis mikroskopas. Tarp prietaiso veidrodžio ir lempos yra mėlynai violetinis filtras. Tai gali būti FS-1, UFS-3 ir pan. Geltonas filtras uždedamas ant mikroskopo okuliaro. Su jų pagalba ant objekto patenka mėlynai violetinė šviesa. Jis sužadina liuminescenciją. Tačiau ši šviesa gali trukdyti matyti švytėjimą. Todėl pakeliui į akį ją nupjauna geltonas filtras. Apšvietimas nustatomas pagal Koehler metodą, išskyrus vieną išimtį. Kondensatoriaus diafragma turi būti visiškai atidaryta. Tiriant svarbu naudoti nefluorescencinę imersinę alyvą. Norėdami sumažinti savo švytėjimą, į jį pridedama nitrobenzeno (2–10 lašų / 1 g).
Liuminescencinė mikroskopija: taikymas mikrobiologijoje
Šio tipo studijų privalumai:
- Spalvoto vaizdo galimybė.
- Didelio kontrasto savaime skleidžiantys elementai juodame fone.
- Tam tikrų tipų virusų ir mikrobų aptikimas ir lokalizavimas.
- Gebėjimas mokytis skaidriai ir nepermatomaigyvi organizmai.
- Gyvenimo procesų jų dinamikos tyrimas.
Taip pat reikėtų pasakyti, kad liuminescencinė mikroskopija prisideda prie geriausių histo- ir citochemijos metodų, greitosios diagnostikos kūrimo.
