Šiuolaikinė medicina turi specifinius diagnostikos metodus, leidžiančius nustatyti žmonių ligų etiologiją, remiantis patogeno apibrėžimu, genetiškai svetimomis medžiagomis, skatinančiomis imuninį atsaką, nukleino rūgštimis, taip pat alerginiais ir imuniniais pokyčiais. kurie atsiranda dėl jo veiksmų. Šiandien RIA plačiai naudojamas imunologijoje ir virusologijoje, tai yra radioimunologinis tyrimas, kurio tikslai, komponentai, eiga, apskaita, aptarsime šiame straipsnyje. Šis tyrimas gali aptikti antigenus dėl jų sąveikos su antikūnais.
Apibrėžimas
RIA – tai biologiškai aktyvių medžiagų skysčiuose diagnostikos metodas, pagrįstas antigenų reakcija su antikūnais naudojant radionuklidais pažymėtas analogiškas medžiagas, turinčias specialias surišimo sistemas. Po jų sąveikossusidaro imuninis kompleksas, kuris atskiriamas ir tiriamas jo radioaktyvumas. Yra žinoma, kad radioimuninis tyrimas atliekamas naudojant standartinius reagentų rinkinius.
Kiekvienas reagentas gali nustatyti vienos konkrečios medžiagos koncentraciją. Iš žmogaus paimtas biologinis skystis sumaišomas su reagentu, pasibaigus inkubaciniam periodui atskiriamos laisvos ir surištos radioaktyviosios medžiagos, tada atliekama radiometrija ir apskaičiuojami rezultatai. Medžiagoms žymėti naudojamas jodo izotopas. Jis pažymėtas ir pridedamas tam tikra suma.
Programa
Radioimuninė analizė plačiai taikoma medicinoje ir mikrobiologijoje. Jis naudojamas širdies ir kraujagyslių, endokrininės ir kitų organizmo sistemų ligoms diagnozuoti. RIA taip pat dažnai naudojamas siekiant nustatyti nevaisingumo priežastį, vaisiaus vystymosi patologiją. Onkologijoje ši analizė atliekama siekiant nustatyti neoplazmų žymenis, kad būtų galima stebėti gydymo veiksmingumą. Imunologijoje RIA naudojamas tiriant imunoglobulinų, fermentų, b altymų ir kt. buvimą kraujyje. Šiandien ši analizė leidžia aptikti įvairių hormonų koncentraciją iki milijonosios vieno gramo. Taigi radioimuninė kraujo analizė plačiai naudojama kardiologijoje, onkologijoje, endokrinologijoje, ginekologijoje ir virusologijoje.
RIA metodai
Priklausomai nuo pobūdžio, įprasta skirti kelis analizės metodusreakcijos:
- Nekonkurencinis metodas pasižymi tokiais reakcijos komponentais kaip standartiniai ir aptinkami antigenai, buferinis tirpalas, izotopais pažymėti antikūnai, tam tikri antikūnai, kurie jungiasi su sorbentu. Antigenas pridedamas prie tiriamų antikūnų. Po inkubacijos atsiranda antigeno-antikūnų kompleksai, sorbentas nuplaunamas, pridedami žymėti antikūnai, kurie jungiasi prie komplekse esančio antigeno. Radioaktyvumas priklauso nuo tiriamo antigeno koncentracijos.
- Konkurencinį radioimuninį tyrimą lemia antigenų konkurencija. Čia yra tokie reakcijos komponentai kaip kontroliniai ir nustatyti antigenai, buferinis tirpalas, tam tikri antikūnai, kurie jungiasi su sorbentu, taip pat izotopais pažymėtas antigenas. Diagnozė prasideda įvedus tiriamą antigeną. Ant sorbento susidaro antigeno-antikūno kompleksas. Tada sorbentas nuplaunamas ir suleidžiamas pažymėtas antigenas. Tai darydamas, jis prisijungia prie antikūnų. Skaitiklių pagalba matuojama reakcija ir radioaktyvumo kiekis. Jis bus atvirkščiai proporcingas antigeno kiekiui mėginyje.
- Netiesioginis metodas yra labiausiai paplitęs. Šiuo atveju reakcijos komponento radioimuninis tyrimas turi tokius kaip kontrolinis ir tiriamasis serumas, antigenai arba antikūnai, kurie yra surišti su sorbentu, antikūnai, pažymėti izotopais, buferiniai tirpalai. Diagnozuoti antikūnai arba antigenai reaguoja su antigenais arba antikūnais, kurie yra prijungti prie sorbento. Tada inkubatas pašalinamas, suleidžiami pažymėti antikūnai, kurie jungiasiantigeno-antikūnų kompleksai.
Analizės metodika
Taigi, radioimuninis tyrimas atliekamas naudojant specialius reagentus. Komplektai yra standartiniai, todėl bet kokios klaidos ar pažeidimai neleidžiami. Diagnostikos rezultatai yra patikimi. Analizė atliekama ryte, tam iš žmogaus paimamas veninis kraujas. Laboratorijoje nuo kraujo atskiriamas serumas, kuris bus naudojamas RIA. Šis serumas sumaišomas su reagentais. Gautas mišinys inkubuojamas tam tikroje temperatūroje termostate.
Laisvieji ir surišti izotopai yra atskiriami gautame mišinyje. Po to gauta medžiaga apžiūrima, skaičiuojami rezultatai. Radioimuninio tyrimo mechanizmas turi keletą galimybių. Aukščiau aprašytas metodas yra skystosios fazės RIA, nes visi komponentai yra skystos būsenos. Yra RIA ir kietoji fazė, kai antikūnai dedami į nešiklį, kuris netirpsta skystyje.
Diagnostikos prieinamumas
Šio diagnostikos metodo naudojimas medicinoje kasmet tampa vis populiaresnis. Pastaruoju metu radioimuninis tyrimas tapo standartiniu diagnostikos metodu, kurį gali paskirti gydytojas, nustatydamas galutinę diagnozę. Ilgą laiką tokio tipo analizė buvo atliekama tik laboratorijose, šiandien ji tapo įprastu tyrimo metodu. Tačiau RIA reikia naudoti brangią įrangą (gama skaitiklius), o reagentų rinkiniai turi trumpą tarnavimo laiką. Visa tai yra pagrindinis tokios analizės trūkumas, kuris lemia josbrangi kaina.
Be to, RIA neseniai pradėjo išstumti modernesnius tyrimo metodus, kuriems nereikia sąveikos su izotopais. Tai apima fermentų imunologinį tyrimą. Taigi, RIA pageidautina daugelyje klinikų. Ji jau seniai naudojama dideliuose miestuose ir diagnostikos centruose, tačiau paprastose mažų miestelių ligoninėse ši analizė praktiškai nenaudojama dėl didelės kainos.
RIA orumas
Radioimuninis tyrimas turi daug privalumų. Jis yra gana specifinis ir turi didelį jautrumą, todėl galima nustatyti biologiškai aktyvių medžiagų buvimą neįtikėtinai mažais kiekiais. Ši analizė atliekama labai paprastai, žmogui tereikia duoti veninio kraujo. Testo rezultatai yra 100% tikslūs ir paruošti jau kitą dieną. RIA taip pat galima lengvai automatizuoti. Taigi ši analizė leidžia nustatyti b altymus, kurie yra infekcinių bakterijų atliekos, o tai rodo, kad organizme yra infekcija.
Diagnostika virusologijoje
Perspektyviausia RIA skirta virusologijai, nes leidžia greitai nustatyti virusų patogenus. Taip yra dėl to, kad pastaraisiais metais auga sergamumas įvairiomis infekcijomis, kurios plinta dideliu greičiu ir sukelia žmonių mirtingumą. Tai ypač pasakytina apie šalis, kuriose nėra aukšto lygiosocialiniam ir ekonominiam vystymuisi (Tolimųjų Rytų šalyse), radioimuninis tyrimas čia tiesiog būtinas. Mikrobiologija taip pat naudoja šį diagnostikos metodą, kad nustatytų infekcines ligas, kurias sukelia patogeninės bakterijos. Pavyzdžiui, RIA plačiai naudojamas vidurių šiltinei aptikti. Pirmosiomis ligos dienomis, prieš skiriant gydymą, būtina atlikti išmatų ir vėmimo tyrimą. Tačiau diagnostikos rezultatai bus gauti po ilgo laiko. Čia į pagalbą ateina RIA, analizė leidžia per trumpą laiką nustatyti ligos sukėlėją. Žmogus duoda kraujo, kitą dieną tyrimo rezultatai yra paruošti. Ši analizė padeda nustatyti tikslią diagnozę.
Rezultatai
Radioimuninis tyrimas šiuo metu yra vienas jautriausių diagnostikos metodų. Jis naudojamas analizuoti bet kokią medžiagą, prieš kurią galima gauti antikūnų. Šis metodas leidžia padaryti daug mėginių mažiausiame tiriamo skysčio tūryje, taip pat užfiksuoti rezultatus per trumpiausią įmanomą laiką, nes tai gali būti visiškai automatizuota. Šią analizę šeštajame dešimtmetyje sukūrė Solomonas Bursonas. Po trisdešimties metų ji išplito. Iki šiol RIA nėra šimtaprocentinės alternatyvos, nes analizė turi didelį jautrumą. RIA naudojamas įvairiose medicinos srityse, taip pat mikrobiologijoje ir virusologijoje.
Pagaliau
Metodo taikymas virusologijoje šiandien yra labai aktualus, nes tai suteikiagebėjimas ištirti infekcijų plitimą, nustatyti tikslią diagnozę ir paskirti specifinį gydymą. Ši problema ypač aktuali žemo ekonomikos ir socialinio išsivystymo lygio šalims. Taip pat ši analizė leidžia nustatyti hormonų ir fermentų kiekį žmogaus organizme. Norint gauti patikimus rezultatus, tyrėjui tereikia paaukoti kraują analizei. Medicina nestovi vietoje, kartu su radioimuniniu tyrimu atsiranda naujų tyrimų metodų, tačiau RIA ir toliau išlieka viena iš medicinos diagnostikos lyderių.
