Atliekant bakterijų tyrimus, reikia kruopštaus darbo su daugybe įrangos ir instrumentų. Kad mikroorganizmai kuo greičiau daugintųsi laboratorinėmis sąlygomis ir galėtų palaikyti normalią gyvybinę veiklą, naudojamos specialios maistinės terpės. Jų sudėtis ir biofizinės sąlygos yra tinkamos aktyviam bakterijų kultūros augimui.
Maistingoji terpė. Mikrobiologija ir kitos programos
Bakterijų kolonijos auginamos laboratorijoje Petri lėkštelėse, užpildytose želė pavidalo arba pusiau skystu turiniu. Tai maistinės terpės, kurių sudėtis ir savybės yra kuo artimesnės natūralioms, kad pasėlis būtų kokybiškas.
Tokios aplinkos naudojamos mikrobiologiniuose tyrimuose ir medicinos diagnostikos laboratorijose. Pastarieji dažniausiai dirba su patogeninių ar oportunistinių bakterijų tepinėliais, kurių sisteminė padėtis nustatoma tiesiogiai įstaigoje.
Natūralus ir sintetinisTrečiadienis
Pagrindinė darbo su bakterijomis taisyklė yra teisingas maistinės terpės pasirinkimas. Jis turi atitikti daugybę kriterijų, įskaitant mikro ir makro elementų, fermentų kiekį, pastovią rūgštingumo vertę, osmosinį slėgį ir net deguonies procentą ore.
Maistingos terpės skirstomos į dvi dideles grupes:
- Natūrali aplinka. Tokie mišiniai ruošiami iš natūralių ingredientų. Tai gali būti upės vanduo, augalų dalys, mėšlas, daržovės, augalų ir gyvūnų audiniai, mielės ir kt. Tokia aplinka pasižymi dideliu natūralių cheminių medžiagų kiekiu, kurių įvairovė skatina bakterijų kultūros augimą. Nepaisant šių akivaizdžių pranašumų, natūrali aplinka neleidžia atlikti specializuotų specifinių bakterijų padermių tyrimų.
- Sintetinė laikmena. Jie skiriasi tuo, kad jų cheminė sudėtis yra žinoma tiksliais visų sudedamųjų dalių santykiais. Tokios terpės ruošiamos specifinei bakterijų kultūrai, kurios metabolizmas tyrėjui žinomas iš anksto. Tiesą sakant, dėl šios priežasties galima paruošti tokią sintetinę aplinką mikroorganizmų vystymuisi. Jie naudojami bakterijų gyvybinei veiklai analizuoti. Pavyzdžiui, galite sužinoti, kokių medžiagų ir kiek jos išskiria į aplinką. Mikroorganizmai augs ir natūralioje terpėje, tačiau neįmanoma atsekti kiekybinių sudėties pokyčių, nes nežinoma pradinių medžiagų proporcijų.
Diferencinis-diagnostinės aplinkos
Dirbant su bakterijomis galima naudoti ne tik įprastas maistines terpes. Mikrobiologija yra didžiulis mokslas, todėl atliekant tyrimą kartais dėl kokių nors priežasčių reikia atrinkti mikroorganizmus. Laboratorijoje naudojant diferencinę diagnostinę terpę, galima atrinkti norimas bakterijų kolonijas Petri lėkštelėje pagal jų gyvybinės veiklos biocheminį požymį.
Tokios aplinkos sudėtis visada apima šiuos komponentus:
1. Maistinės medžiagos ląstelių augimui.
2. Analizuojamas substratas (medžiaga).
3. Indikatorius, kuris įvykus tam tikrai reakcijai suteiks būdingą spalvą.
Pavyzdys yra diferencinės diagnostikos maistinė terpė "Endo". Jis naudojamas bakterijų kolonijoms, kurios gali skaidyti laktozę, atrinkti. Iš pradžių ši terpė turi rausvą spalvą. Jei mikroorganizmų kolonija nesugeba suskaidyti laktozės, ji įgauna įprastą b altą spalvą. Jei bakterijos gali suardyti šį substratą, jos įgauna būdingą ryškiai raudoną spalvą.
Pasirenkamieji trečiadieniai
Diagnostikos laboratorijose dažnai dirbama su tamponais, kuriuose yra daug įvairių bakterijų tipų. Akivaizdu, kad kokybiškam darbui reikia kažkaip atrinkti mums reikalingas kolonijas iš dešimčių pašalinių žmonių. Čia gali padėti bakterijų auginimo terpė, kuri idealiai sukurta palaikyti tik vieno tipo mikroorganizmus.
Pavyzdžiui,tokia pasirenkama aplinka tinka tik Escherichia coli dauginimuisi. Tada, pasėjus daug bakterijų ant Petri lėkštelės, matysime tik tos pačios Escherichia coli kolonijas ir ne daugiau. Prieš pradedant darbą, norint sėkmingai atrinkti ją iš kitų rūšių mišinio, būtina gerai išmanyti tiriamos bakterijos metabolizmą.
Kieta, pusiau kieta ir skysta auginimo terpė
Bakterijas galima auginti ne tik ant kieto substrato. Maistinės terpės skiriasi viena nuo kitos agregacijos būkle, kuri priklauso nuo sudėties gamybos metu. Iš pradžių jie visi yra skystos konsistencijos, o įpylus tam tikru procentu želatinos ar agaro, mišinys sukietėja.
Skystos auginimo terpės paprastai randamos mėgintuvėliuose. Jei atsiranda būtinybė tokiomis sąlygomis auginti bakterijas, įpilkite tirpalo su kultūros mėginiu ir palaukite 2-3 dienas. Rezultatas gali skirtis: susidaro nuosėdos, atsiranda plėvelė, plūduriuoja nedideli dribsniai arba susidaro drumstas tirpalas.
Tanki auginimo terpė dažnai naudojama mikrobiologiniuose tyrimuose, siekiant ištirti bakterijų kolonijų savybes. Tokios terpės visada yra skaidrios arba permatomos, kad būtų galima teisingai nustatyti mikroorganizmų kultūros spalvą ir formą.
Žiniasklaidos rengimas
Substratus, tokius kaip mėsos ir peptono mišiniai sultinio, želatinos arba agaro pagrindu, paruošti labai lengva. Jei reikia pagaminti kietą arba pusiau skystą substratą, į skystįįpilkite atitinkamai 2-3% arba 0,2-0,3% želatinos arba agaro. Jie atlieka pagrindinį vaidmenį kietinant mišinį, tačiau jie nėra maistinių medžiagų š altinis. Taigi gaunamos maistinės terpės, tinkamos bakterijų kultūrai augti.
