Šis straipsnis bus skirtas kritulių reakcijos reiškiniui. Čia apžvelgsime šio reiškinio formulavimo ypatybes, sklaidos reiškinį, bendras charakteristikas, vaidmenį žmogaus gyvenime ir daug daugiau.
Įvadas į reiškinį
Nusodinimas yra serologinio tipo reiškinys, kurio metu tirpūs antigenai sąveikauja su antikūnais ir dėl to stebimas nusodinimas – nuosėdos.
Bendra kritulių reakcijos charakteristika yra tam tikra koordinuota antigeno ir antikūno įtaka. Šios sąveikos rūšys leidžia nustatyti nežinomų antigenų buvimą bandomojoje medžiagoje, pridedant žinomų antikūnų ir antigenų. Nusodinimo procesas be druskų vyks blogiau, o geriausias optimalus pH yra 7,0–7,4 pH.
Reakcijos sudedamosios dalys
Tarp kritulių reakcijos komponentų yra trys pagrindiniai elementai:
- Molekulinės prigimties antigenas. Jis yra gero tipo būsenoje, kitaip tariant, jistirpus. Be to, toks antigenas vadinamas precipitogenu, kuris yra lizatas arba audinių ekstraktas ir tt Precizogenas turi būdingą skirtumą nuo agliutinogeno, kuris slypi dalelių, iš kurių jis susideda, dydžiu. Agliutinogenas turi būdingą ląstelių dydį, o nuosėdų kiekis yra proporcingas molekulės dydžiui. Antigeno tirpalas pasižymi skaidrumu.
- Žmogaus kraujo serume, taip pat imuninės diagnostikos serume, kuriame yra tirtų antikūnų, rastas antikūnas.
- Elektrolitai yra natrio chlorido tirpalai, kurie yra izotoniniai.
Precipitogeno gamyba
Nusodinimo reakcijos nustatymas neįmanomas be precipitogeno, kuris gaunamas sumalant medžiagas ir iš jų ekstrahuojant b altymų antigenus. Ekstrahuojama verdant ar kitais būdais.
Lizatai, taip pat audinių ir organų ekstraktai, kraujo serumas, įvairių tipų filtratai, pagrįsti mikrobų sultinio kultūromis, taip pat mikroorganizmų druskų ekstraktas ir autolizatinės medžiagos yra ryškūs. nusodinamų medžiagų pavyzdys.
Nustatymas kritulių metu
Dabar apsvarstykime nusodinimo reakcijos nustatymo būdą.
Atliekama žiedo nusodinimo reakcija, kuri vyksta specialiai paruoštuose mėgintuvėliuose. Serumas įleidžiamas į indų ertmę, pipetės snapelio pagalba pilamas per sieną. Tada ant viršaus atsargiai sluoksniuojamas atitinkamas nusodintuvo kiekis, o po to vamzdelis pakeliamas į vertikalią padėtį iš horizontalios. Nustatymas ir atsižvelgimas į kritulių reakciją yra labai kruopšti operacija. Rezultatas registruojamas po to, kai ant ribos tarp antigeno ir antikūno atsiranda b altas žiedas. Jei reaguojantys reakcijos elementai atitinka vienas kitą, tada jie jungiasi, bet tai tampa pastebima po ilgo jų sąveikos laiko.
Nusodinimo reakcija taip pat atliekama Petri lėkštelėje arba ant stiklinės stiklelis, į kurį perpilamas agaro gelis, užtepus jį nedideliu sluoksniu. Po to, kai jis sukietėja gelyje, išpjaunama keletas šulinėlių, į kurias bus dedami antigenai ir antikūnai. Šį veiksmą galima atlikti dviem būdais: radialinės imunodifuzijos ir dvigubos imunodifuzijos metodu.
Bendra informacija
Nukritulių darbo mechanika panaši į agliutinacijos įtaiso. Imuninio tipo serumo įtakoje antigenas, kuris jau įsitraukė į reakciją, sumažina jo dispersiškumo laipsnį. Svarbi sąlyga yra serumo ir antigeno skaidrumas.
Galite pagerinti reakcijos registraciją, jei ant antikūnų uždėsite antigenus. Dėl to galima pastebėti nuosėdų atsiradimą žiedo pavidalu. Šis reiškinys vadinamas žiediniu nusodinimu ir atliekamas specialiuose vamzdeliuose, kurių skersmuo nuo 2,5 iki 3,5 mm. Vienas iš labiausiai paplitusių kritulių reakcijos pavyzdžių yra juodligės diagnozė.
Nuokritos leidžia nustatyti difterijos pasėlių toksiškumo lygį agare.
Nagrinėjamos reakcijos metuatsiranda antigeninių kompleksų ir antikūnų nusodinimas. Krituliai yra imunologinis reiškinys, leidžiantis nustatyti antikūnų kiekį sergančio ar paskiepyto žmogaus ir gyvūnų kraujo serume.
Titravimo pasekmė
Svarbu žinoti, kad duomenys, gauti titruojant aukščiau nurodytu metodu, nėra kiekybiškai įvertinami. Norint sukurti ir išanalizuoti kiekybinį antikūnų skaičiaus įvertinimą, M. Heidelbergeris ir E. Kabatas sukūrė specialią reakcijos techniką, kuri paremta lygiavertės zonos paieška ir identifikavimu. Antigenų amžiaus skaičiaus sumaišymas su pastoviu antiserumo tūriu padidina iš pradžių susidariusių nuosėdų kiekį, o vėliau vėl sumažėja, nes padidėja gebėjimas ištirpinti antigenų kompleksus. Nustatę antikūnų kiekį kiekviename mėgintuvėlyje esančiuose supernatantuose, galite pastebėti, kad tam tikram skaičiui indelių su antikūnais trūks skysčio. Čia, palyginti su kitais mėgintuvėliais, susidarys didžiausios nuosėdos. Dėl to ir iš bendros b altymų vertės atėmus antigeninių b altymų nuosėdas, galima gauti tikslią antikūnų, esančių konkretaus tiriamo serumo tūryje, vertę. Be to, b altymų molekulių kiekis nuosėdose nustatomas pagal azoto kiekį arba naudojant kolorimetrinius metodus.
Verčių įvertinimas
Apskaičiuojant kritulių reikšmes diagnostinėje metodikoje turėtų būti atsižvelgiama į galimybę imuniniame serume atsirasti antikūnų, neturinčių nusodinimo savybių, todėl pačios nuosėdos gali nebūti susidaro po reakcijos su antigenais. Tokių molekulių sąraše yra neišsamių antikūnų ir kai kurių rūšių iš gama-A globulinų grupės.
Nusodinimo reakcija laboratorinėmis sąlygomis pritaikoma įvairiose modifikacijose. Pavyzdžiui, termoprecipitacijos reakcija naudojama aptikti botulizmo, juodligės ir kt. bakterijų antigenus, kurie termiškai nedenatūruojami. Skirtingai nuo žiedinio nusodinimo, šio tipo reakcijos metu naudojami virintos medžiagos filtratai.
Nusodinimo reakcijos analizė sudėtingame mišinyje neleidžia apibūdinti atskirų mišinio elementų savybių. Tokiais atvejais žmogus naudojasi nusodinimo agare metodu, taip pat naudoja imunoelektroferezę.
Pasklidieji krituliai
Šioje mokslinių tyrimų srityje yra difuzinės kritulių reakcijos (RPD) koncepcija. Jis pagrįstas gebėjimu difunduoti antikūnų ir tirpių antigenų gelyje. Difuzija – tai tam tikros medžiagos molekulės gebėjimas prasiskverbti į kitos molekules, kurią sukelia terminis judėjimas.
Gelis yra dispersinio tipo sistema, kurioje skystoji fazė kietoje fazėje pasiskirsto tolygiai. Dažniausiai tokiai reakcijai naudojamas agaro gelis.
Pateikus parametrus,sąlygomis, kuriomis molekulės gali difuzuoti viena kitos atžvilgiu, jų susitikimą lydės antigeno + antikūno komplekso susidarymas. Toks neoplazmas gali išsisklaidyti, būdamas pačiame gelyje, ir nusodins, įgaudamas plika akimi aptinkamą juostelės formą. Jei antigenas ir antikūnas yra homologiški, nesusidarys jokia juosta.
Sąlygų, kuriomis difuzija vyks agaro sluoksnyje, sukūrimas apima komponentų išpylimą, tačiau bendras šulinėlių skaičius ir jų santykinė padėtis nustatomi pagal nuspręsti, kokio tipo užduotis reikia. RPD suteikia žmogui galimybę aptikti ir identifikuoti nežinomus izoliuotus virusus, atliekant tyrimus naudojant žinomus antikūnų serumus.
Programa
Nuokritos plačiai naudojamos ne tik diagnozuojant ligas, bet ir atliekant teismo medicinos ekspertizę. Sunku įsivaizduoti analizę, kurios metu būtų galima nustatyti ant nusik altimo ginklo, kuris nenaudoja kritulių reakcijos, rastos kraujo, organo ar audinio dalies rūšis. Šio proceso metu naudojami nusodinamieji serumai, kurie gaunami imunizuojant įvairius gyvūnus ir paukščius. Svarbu, kad serumo titro lygis būtų ne mažesnis nei 1:10000, be to, jis turi būti pakankamai specifiškas. Iš aptiktos kraujo ar jo plutos dėmės daromas ištrauka fizinei. tirpalas, kuris bus toliau veikiamasnusodinantis serumas. Pagal šią reakciją galima nustatyti tiek žmonių, tiek gyvūnų audinių ir organų b altymų tipus. Gaunant drumstus ekstraktus, reikia naudoti nuosėdas ant agaro.
Išvados
Analizuodami perskaitytą informaciją, galime daryti išvadą, kad kritulių reakcijos žmogui yra nepaprastai svarbios, nes leidžia diagnozuoti įvairius antigenus naudojant antikūnus, šis reiškinys taip pat plačiai naudojamas teismo medicinos ekspertizėje ir leidžia nustatyti, kokio tipo kraujas, audinys ar organas, susijęs su konkrečiu subjektu. Yra keletas nusodinimo tipų ir būdų, kurie naudojami atsižvelgiant į iškylančius sprendžiamos problemos poreikius.
